Введение. Дисфункция сперматозоидов считается самой частой причиной бесплодия, которое затрагивает приблизительно 1 из 15 мужчин [1], что чаще по сравнению с другими распространенными заболеваниями, такими, например, как сахарный диабет. Таким образом, мужская субфертильность представляет собой глобальную проблему.

До настоящего времени терапия мужской инфертильности остается недостаточно эффективной, особенно по сравнению с достижениями в лечении бесплодных женщин. Мужчины принимают антиоксиданты в надежде увеличить свои шансы на зачатие, но пока подобная терапия носит эмпирический характер и требует доказательной базы, частью которой может стать проведенное нами исследование [2].

В связи с этим изучение молекулярных механизмов действия препаратов на основе биологически активных соединений различной природы является актуальной задачей современной репродуктивной медицины. Целью мероприятий по преодолению бесплодия служит достижение эугонадного состояния, которое может быть реализовано путем устранения причин его возникновения, что трудноосуществимо, либо коррекцией основных синдромов через влияние на ключевые патологические звенья и молекулярные мишени, исходя из понимания механизмов повреждения и адаптации процесса фертилизации. Ведущая роль окислительного стресса в генезе расстройств детородной функции предопределяет необходимость восстановления баланса про- и антиоксидантных систем и подразумевает избирательное воздействие на энергетический, липидный, белковый и нуклеотидный домены субклеточных структур и макромолекул [3].

Лечение идиопатического бесплодия представляет собой трудную задачу, поскольку оно не может быть специфическим вследствие неопределенности этиологии и неоднородности контингента пациентов.

В связи с этим терапия инфертильности невыясненной природы основана на общности патогенеза и предусматривает коррекцию окислительного стресса, а также восполнение дефицита минорных соединений, таких как цинк, селен, токоферол, фолиевая кислота, L-карнитин и др. [4, 5]. Анализ клинической эффективности сбалансированной комбинации этих микронутриентов является актуальной проблемой репродуктивной медицины.

Цель исследования: охарактеризовать влияние комплекса Сперотон на показатели cвободнорадикального гомеостаза эякулята мужчин из бесплодных семейных пар и вероятность наступления беременности.

Материалы и методы. В исследование были включены 30 мужчин из бесплодных пар с идиопатическим бесплодием в возрасте от 26 до 43 лет (средний возраст – 33±4,8 года).

Все пациенты получали препарат Сперотон по 1 саше 1 раз в день во время еды в течение 3 мес, что соответствует продолжительности цикла сперматогенеза.

Исследование спермограммы осуществлялось в соответствии с требованиями Руководства ВОЗ двукратно до лечения и через 3 мес после начала приема препарата. Оценивали концентрацию, подвижность и морфологию сперматозоидов, объем эякулята.

Определение параметров окислительного статуса эякулята – гидропероксидов липидов (LPx), карбонилированных дериватов белков, биомаркера окислительного повреждения ДНК (8-oxodGu) – проводили с помощью стандартных тест-систем методом иммуноферментного анализа по протоколу, согласно рекомендациям производителя. Данные показатели оценивались по сравнению с контрольной группой, которую составили 29 фертильных мужчин, имевших от 1 до 3 здоровых детей.

Критерии включения: возраст 20–45 лет; отсутствие беременности партнерши в браке (более 12 мес половой жизни без контрацепции); отсутствие клинических и лабораторных признаков воспалительного процесса в половых железах; отсутствие инфекций репродуктивного тракта; отсутствие аутоиммунных реакций против сперматозоидов (образования антиспермальных антител); концентрация сперматозоидов не менее 10 млн/мл; отсутствие нарушений эякуляции; отсутствие соматических заболеваний.

Критерии исключения: обтурационная или иммунологическая форма бесплодия; наличие бесплодия у партнерши; алкогольная или наркотическая зависимость; повышенная чувствительность к любому из компонентов препарата; нарушение функции печени и почек; участие в другом клиническом исследовании в последние 3 мес.

Для статистической обработки использован пакет программ MS Excel 2003 SPSS 12.0 для Windows. Статистическую значимость изменений оценивали с использованием парного t-теста Стьюдента.

Результаты и обсуждение. Анализ рутинной спермограммы бесплодных мужчин продемонстрировал отсутствие отклонений от нормы основных показателей: объема эякулята, концентрации и общего количества сперматозоидов, а также содержания их патологических форм.

Параметры окислительного статуса эякулята до и после назначения препарата приведены в таблице.

У бесплодных пациентов исходный уровень LPx, первичных продуктов окисления липидов был статистически значимо выше, чем у фертильных доноров. На фоне приема препарата он снизился и перестал отличаться от контрольных значений (p>0,05). Гидропероксиды липидов нестабильны и превращаются в агрессивные продукты свободнорадикального окисления: малоновый диальдегид, наиболее мутагенный агент, и высокотоксичный 4-гидроксиноненаль, непосредственно подавляющий подвижность сперматозоидов.

У мужчин с бесплодием констатировано также увеличение содержания биомаркера окислительного повреждения ДНК 8-oxodGu (в 1,6 раза по сравнению со здоровыми донорами). В клинических исследованиях было подтверждено, что примерно у 60% пациентов ВРТ-центров и 80% мужчин с диагнозом идиопатического бесплодия обнаруживается патология ДНК сперматозоидов умеренной и тяжелой степеней [6]. По нашим данным, поступление комплекса биологически активных соединений, входящих в состав Сперотона, сопровождалось уменьшением 8-oxodGu почти до уровня фертильных мужчин.

Особая роль в повреждении клеточных структур при инициации свободнорадикальных процессов принадлежит карбонильной трансформации белков как важнейшему компоненту протеолиза. В данном исследовании установлен прирост концентрации карбонильных остатков у бесплодных мужчин до 44,1±3,2 нм/мг против 28,7±3,0 – у фертильных доноров (p<0,05). Этот показатель коррелирует со степенью окислительной деструкции белка в эякуляте. Среднее содержание карбонильных дериватов после терапии снижалось до 37,5±3,3 нм/мг. Образование карбонилпептидов может быть следствием активации лизосомальных гидролаз и разрушения спермальных белков с развитием карбонильного стресса в репродуктивной системе.

Очевидно, эффекты Сперотона обусловлены влиянием его компонентов на различные звенья патогенеза бесплодия [7, 8]. Так, карнитин, выполняющий роль молекулярного челнока в переносе жирнокислотных остатков в митохондрии, активирует синтез макроэргов, повышает эффективность процессов сопряжения окисления и фосфорилирования в сперматозоидах, препятствуя утечке электронов из дыхательной цепи, тем самым оказывая непрямое антиоксидантное действие. Селен как эссенциальный кофактор различных изоформ глутатионпероксидазы предотвращает окислительное повреждение тестикул и нормализует андрогенопоэз. Витамин Е, природный антиоксидант, является универсальным протектором клеточных мембран от окислительного повреждения, обладает также свойствами антигипоксанта и иммуномодулятора. Цинк входит в состав спермспецифического белка протамина HP2, необходимого для правильной упаковки и конденсации хроматина в гаметах. Фолиевая кислота препятствует развитию анеуплоидии сперматозоидов, поэтому мужчинам, планирующим зачатие, рекомендуется прием до 400 мкг этого витамина в сутки.

Рациональность подобного комплексного подхода была подтверждена в многочисленных экспериментальных и клинических исследованиях. Так, у 5 семейных пар группы наблюдения констатировали наступление беременности, т.е. результативность терапии составила 16,7%. В других работах также была отмечена эффективность применения различных антиоксидантов и их комбинаций. В частности, в Кокрановском обзоре 48 рандомизированных контролируемых исследований определен 10%-ный уровень наступления беременности на фоне антиоксидантной терапии [9]. В работе S. Brody [10] беременность была диагностирована у 18–20% партнерш мужчин с необъяснимыми изменениями показателей спермограммы. Г. Т. Сухих и соавт. [11] сообщают о 15%-ной эффективности комплекса Сперотон при идиопатическом бесплодии.

Заключение. В настоящем исследовании установлено, что прием комплексного препарата Сперотон в использованных дозах в течение 3 мес приводил к нормализации антиоксидантных характеристик эякулята, что проявлялось в угнетении переокисления липидов, дезинтеграции ДНК сперматозоидов и тенденции к снижению карбонилирования спермальных белков. Выявленные молекулярные механизмы действия Сперотона лежат в основе восстановления оплодотворяющей способности эякулята и повышения вероятности благоприятных исходов естественной беременности. Применение препарата сопровождалось увеличением частоты зачатия на 16,7%. Сперотон является перспективным комплексным препаратом, который улучшает функциональные характеристики сперматозоидов, способствуя развитию беременности у супружеских пар с мужским фактором бесплодия. Дальнейшие исследования позволят уточнить схемы назначения препарата с целью совершенствования методики лечения инфертильности.