Введение. Как известно, основные показатели фертильности спермы – общая концентрация сперматозоидов в эякуляте, их подвижность и морфология. Бесспорным является факт, что помимо подвижности, жизнеспособности и концентрации сперматозоидов в процессе оплодотворения яйцеклетки важнейшую роль играет акросомная реакция. В 5–10% случаев причиной бесплодия служит нарушение спонтанной и/или индуцированной акросомной реакции [1]. Однако оценка акросомной реакции сперматозоидов в рутинных исследованиях не проводится.
Известно, что основные показатели спермограммы в значительной мере подвержены воздействию различных как эндогенных, так и экзогенных факторов.
В литературе достаточно сведений о влиянии различных факторов на подвижность сперматозоидов как непосредственно в самом эякуляте, так и в половом тракте женщины: pH спермы и содержимого влагалища, концентрации минеральных веществ и фруктозы в эякуляте, перитонеальной жидкости, ее клеточного, цитокинового, электролитного состава и др. [2]. Среди множества методов медикаментозной терапии мужского бесплодия использованию препаратов L-карнитина и цинка уделяется значительное внимание [3–6], однако нет четкого объяснения механизма влияния этих препаратов на показатели спермограмм.
Цель настоящего исследования – выяснить влияние биологически активной добавки к пище спематон (Свидетельство о государственной регистрации № RU.77.99.11.003.E.018281.06.11 от 02.06.2011) на функциональные характеристики сперматозоидов, включая акросомную реакцию.
Материалы и методы. В исследование вошли 65 мужчин из бесплодных пар. Критерии включения: отсутствие беременности в браке (более года половой жизни без контрацепции); отсутствие клинических и лабораторных признаков воспалительного процесса в половых железах; отсутствие инфекций репродуктивного тракта (Chlamydia trachomatis, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis, Trichomonas vaginalis), определяемых методом полимеразной цепной реакции; отсутствие аутоиммунных реакций против сперматозоидов, сопровождающихся выработкой антиспермальных антител; концентрация сперматозоидов не менее 10 млн/мл; отсутствие эякуляторных нарушений; отсутствие выраженных соматических заболеваний.
Все пациенты получали спематон перорально 1 раз в день перед едой.
Прием спематона был начат за 3 месяца до предполагаемого зачатия. Это связано с тем, что время созревания сперматозоидов составляет 72 дня и вещества, положительно влияющие на сперматогенез, должны поступать в организм в течение всего этого периода.
Исследование спермы проведено в соответствии с требованиями ВОЗ [7]: определяли концентрацию, подвижность и долю нормальных форм, методом MAR выявляли долю сперматозоидов, покрытых антиспермальными антителами. Для оценки спонтанной и индуцированной ионофором кальция — антибиотиком А 23187 акросомной реакции использовали способ двойного флюоресцентного окрашивания сперматозоидов [8]. Нарушениями акросомной реакции считали показатели спонтанной акросомной реакции более 20%, индуцированность — менее 15% [9].
В дальнейшем из исследования были исключены 26 пациентов, у половых партнерш которых в процессе обследования были установлены явные факторы женского бесплодия: нарушения овуляции, непроходимость маточных труб, распространенный эндометриоз. У 39 мужчин, вошедших в анализируемую группу, имели место различные формы патоспермии (олиго-, астено-, тератозооспермия).
Полученные лабораторные данные обработаны методами вариационной статистики при помощи t-критерия Стьюдента для независимых и парных значений, χ2 и критерия знаков.
Результаты. За 3 месяца лечения, что соответствует продолжительности цикла сперматогенеза, беременность наступила у половых партнерш 8 (20,5%) пациентов.
Оценка акросомной реакции показала, что доля спонтанно (преждевременно) прореагировавших сперматозоидов не изменилась (см. таблицу). Однако доля сперматозоидов с индуцированной акросомной реакцией увеличилась более чем в 1,5 раза (p<0,001), а индуцируемость – показатель, представляющий собой разницу между долей сперматозоидов, спонтанно (преждевременно) утративших акросому, и долей сперматозоидов, претерпевших акросомную реакцию после действия ионофора кальция 23187 (действие ионофора симулирует контакт сперматозоида с яйцеклеткой), – почти в 3,5 раза (p<0,001). У 36 (92,3%) из 39 пациентов зафиксирован рост индуцируемости (p<0,01). Причем данные изменения наблюдались уже через 1 мес от начала приема спематона.
Каких-либо побочных действий, связанных с приемом спематона обследованными пациентами, зафиксировано не было.
Обсуждение. Важнейшей функцией сперматозоидов, играющей ключевую роль в проникновении сперматозоида через оболочку яйцеклетки, служит акросомная реакция – рецепторопосредованная активация и высвобождение протеолитических ферментов [10]. Акросомная реакция возникает при поступлении ионов кальция внутрь сперматозоида. Считается, что в норме акросомная реакция происходит в результате взаимодействия рецепторов галактозилтрансферазы на головке сперматозоидов со специфическими антигенами блестящей оболочки (ZP3 и др.), что приводит к активному транспорту внутрь головки сперматозоида Са2+ и Na+ в обмен на Н+. Увеличение внутриклеточной концентрации Са2+ активирует Са2+-зависимую фосфолипазу, в результате изменяется уровень вторичных посредников – циклических нуклеотидов. Вслед за этим активируется протонная АТФаза, что приводит к увеличению внутриклеточного рН. Увеличение концентрации Са2+ в цитозоле и повышение рН в головке сперматозоида запускают акросомную реакцию [11, 12].
Полученные нами данные убедительно свидетельствуют, что наступление беременности на фоне приема спематона обусловлено главным образом влиянием его компонентов на функциональные характеристики сперматозоидов, поскольку концентрация, подвижность и морфология сперматозоидов в этот период фактически не изменились. Наиболее наглядны при этом изменения индуцируемости акросомной реакции. Именно показатель индуцируемости акросомной реакции характеризует количество сперматозоидов, действительно способных преодолеть блестящую оболочку и оплодотворить яйцеклетку [13]. Полученные результаты легко объяснить давно известными данными, будто сперматозоиды приобретают оплодотворяющую способность только после 2-недельного продвижения через придаток и «дозревания» в семенных пузырьках [14, 15]. Есть основания считать, что дефицит специфических компонентов, таких как L-карнитин, цинк, витамин Е, нарушает капацитацию, а добавление их при лечении способно восстанавливать утраченные функции сперматозоидов.
Заключение. Таким образом, спематон, содержащий L-карнитин, цинк, витамин Е, способствует восстановлению нарушенной индуцируемости акросомной реакции сперматозоидов, при этом эффект проявляется уже через 1 мес от начала его приема.